Analiza genei PKD1- Boala polichistica renala autozomal dominanta (secventiere NGS + LR-PCR)

Analiza genei PKD1 este un test genetic complex bazat pe secvențiere de nouă generație (NGS) combinată cu tehnica LR-PCR (Long-Range PCR), utilizat pentru identificarea variantelor patogene în gena PKD1, responsabilă de majoritatea cazurilor de boală polichistică renală autozomal dominantă (ADPKD). Testul este proiectat pentru a depăși dificultățile tehnice specifice genei PKD1, inclusiv prezența pseudogenelor și regiunilor genomice cu omologie ridicată.

*Termenul de execuție reprezintă numărul maxim de zile lucrătoare în care va fi eliberat rezultatul. Acest termen are rol informativ și va fi confirmat în punctul de recoltare.
Ghid de recoltare (recomandări)

Descrierea serviciului

Analiza are rol esențial în confirmarea diagnosticului, evaluarea prognosticului și consilierea genetică familială în ADPKD.

Termen de execuție*

45–55 zile lucrătoare

Despre analiza genei PKD1 – ADPKD (NGS + LR-PCR)

Gena PKD1, localizată pe cromozomul 16p13.3, codifică proteina policistina-1, implicată în reglarea proliferării celulare și a structurii tubulare renale. Mutațiile în PKD1 sunt responsabile de aproximativ 85% din cazurile de ADPKD, având un impact major asupra severității și progresiei bolii.

Analiza PKD1 este tehnic dificilă din cauza existenței a multiple pseudogene cu omologie ridicată, ceea ce poate genera erori de aliniere în secvențierea standard. Pentru a depăși aceste limitări, testul utilizează:

  • LR-PCR (Long-Range PCR) pentru amplificarea specifică a regiunilor PKD1 autentice
  • secvențiere NGS pentru detectarea variantelor punctiforme și a micilor inserții/deleții
  • analiză bioinformatică avansată pentru diferențierea variantelor reale de artefacte

Această abordare permite o acuratețe crescută în identificarea variantelor patogene chiar și în regiunile complexe ale genei.

Afecțiuni sau simptome asociate

Testul este indicat în evaluarea:

  • bolii polichistice renale autozomal dominante (ADPKD)
  • insuficienței renale cronice de etiologie genetică suspectată
  • rinichilor măriți bilateral cu multiple chisturi
  • hipertensiunii arteriale precoce asociate afectării renale
  • hematuriei persistente sau episodice
  • dureri lombare cronice cu suspiciune de ADPKD
  • aneurismelor intracraniene asociate ADPKD
  • istoric familial de boală polichistică renală

Cui se adresează

  • pacienților cu suspiciune clinică sau imagistică de ADPKD
  • pacienților cu diagnostic imagistic incert sau incomplet
  • persoanelor cu insuficiență renală progresivă fără cauză clară
  • pacienților cu istoric familial de ADPKD
  • rudelor de gradul I ale pacienților diagnosticați
  • pacienților evaluați pentru transplant renal sau planificare terapeutică

Metodologie de testare

  • extracție ADN genomic din sânge periferic EDTA
  • amplificare specifică prin Long-Range PCR (LR-PCR) a regiunilor PKD1
  • secvențiere de nouă generație (NGS) a fragmentelor amplificate
  • analiză bioinformatică pentru diferențierea PKD1 de pseudogene
  • identificarea variantelor:
    • SNV (single nucleotide variants)
    • INDEL (inserții/deleții mici)
    • variante patogene sau probabil patogene
  • corelare cu datele clinice și fenotipul reno-urinar

Beneficii și importanță clinică

  • confirmă diagnosticul molecular al ADPKD
  • permite identificarea precoce a formelor genetice chiar înainte de simptome severe
  • ajută la estimarea prognosticului (riscul de progresie spre insuficiență renală)
  • facilitează consilierea genetică familială și testarea rudelor
  • contribuie la luarea deciziilor terapeutice și monitorizarea pe termen lung
  • îmbunătățește acuratețea diagnostică în cazurile dificile din punct de vedere imagistic
  • reduce necesitatea investigațiilor repetitive

Particularități și limitări

  • analiza este complexă din cauza existenței pseudogenelor PKD1
  • pot exista variante cu semnificație incertă (VUS)
  • nu toate tipurile de rearanjamente genomice mari pot fi detectate
  • rezultatul trebuie corelat cu ecografia sau RMN-ul renal și cu istoricul familial
  • un rezultat negativ nu exclude complet ADPKD (posibila implicare a genei PKD2 sau a altor gene)
  • interpretarea necesită corelare clinică și genetică specializată

Tip probă și condiții de recoltare

Probă necesară:

  • sânge integral EDTA

Volum recomandat:

  • 2 × 6 ml sânge periferic

Condiții de recoltare:

  • recoltare prin puncție venoasă standard în vacutainer cu EDTA
  • transport în condiții controlate conform protocolului laboratorului
  • nu necesită pregătire specială
  • recomandată completarea anamnezei clinice și familiale

Analize asociate recomandate

  • Analiza PKD2 (ADPKD) – completare diagnostic genetic
  • Panel NGS boli renale ereditare – diferențiere diagnostică extinsă
  • MLPA PKD1/PKD2 – detecția delețiilor/duplicațiilor mari
  • Ecografie renală / RMN renal – evaluare structurală și stadializare
  • Test genetic familial ADPKD – screening rude grad I
  • Evaluare neurologică (anevrisme intracraniene) – în cazuri selectate

Caracteristici analize medicale

Termen de execuție: 45 zile lucrătoare
Se poate recolta la domiciliu: Da
Coșul meu