FISH pentru cromozomul X si gena SRY

Testul este esențial în evaluarea discordanțelor de dezvoltare sexuală (DSD), anomaliilor de diferențiere sexuală și a situațiilor în care există neconcordanță între fenotip, cariotip și determinarea genetică a sexului.

Termen de execuție*

35 zile lucrătoare

Despre analiza FISH X și SRY

Tehnica FISH utilizează sonde fluorescente specifice care se leagă de secvențe ADN țintă, permițând vizualizarea directă a cromozomilor sau regiunilor genetice la nivel celular.

În acest test sunt utilizate sonde pentru:

• cromozomul X (detecția numărului de copii și a anomaliilor structurale)

cromozomul Y

• gena SRY (Yp11.3) – regiunea critică implicată în determinarea sexului masculin

Prezența sau absența semnalului SRY permite evaluarea corectă a sexului genetic și identificarea unor condiții de tip:

• prezență SRY în cariotip 46,XX (XX masculin)
• absență SRY în cariotip 46,XY (XY cu sex inversat sau disgenezie gonadală)
• mozaicism cromozomial
• anomalii structurale ale cromozomilor sexuali

Afecțiuni sau indicații clinice asociate

Testul este indicat în:

• tulburări de diferențiere sexuală (DSD)
• ambiguitate genitală la nou-născut
• discordanță între fenotip și cariotip
• suspiciune de sindrom Turner (45,X)
• suspiciune de sindrom Klinefelter (47,XXY)
• sindrom Swyer (46,XY cu disgenezie gonadală)
• sex reversal (XX masculin / XY feminin)
• infertilitate masculină de cauză genetică
• evaluarea prezenței translocațiilor implicând SRY
• mozaicism cromozomial implicând cromozomii sexuali

Cui se adresează

• nou-născuților cu ambiguitate genitală
• copiilor cu dezvoltare sexuală atipică
• pacienților cu suspiciune de DSD
• persoanelor cu infertilitate inexplicată
• pacienților cu cariotip anormal sau incert
• cazurilor cu suspiciune de aneuploidii ale cromozomilor sexuali
• echipelor de genetică medicală și endocrinologie pediatrică
• cazurilor prenatale sau postnatale cu neconcordanțe fenotip-genotip

Metodologie de testare

• recoltare probă de sânge periferic EDTA
• fixare și preparare lame citogenetice
• hibridizare in situ fluorescentă (FISH) cu sonde specifice pentru:
  • cromozomul X
  • cromozomul Y
  • gena SRY
• vizualizare prin microscopie cu fluorescență
• analiză a semnalelor nucleare în metafază și interfază
• evaluare:
  • număr de cromozomi sexuali
  • prezență/absență SRY
  • mozaicism cromozomial
  • anomalii structurale implicând regiunea Yp11.3
• interpretare conform standardelor citogenetice internaționale

Beneficii și importanță clinică

• permite determinarea precisă a sexului genetic în cazuri complexe
• identifică prezența sau absența genei SRY
• ajută la diagnosticul diferențial al tulburărilor de diferențiere sexuală
• detectează aneuploidii ale cromozomilor sexuali
• evidențiază mozaicismul cromozomial
• sprijină deciziile medicale în endocrinologie pediatrică și genetică
• contribuie la consilierea genetică a familiilor
• oferă informații esențiale în cazuri de ambiguitate genitală

Particularități și limitări

• nu oferă secvențiere genetică la nivel de nucleotid (nu detectează mutații punctiforme)
• rezoluția este limitată la regiunile țintite de sonde
• poate rata rearanjamente foarte mici sau complexe în afara regiunii analizate
• necesită corelare cu cariotip clasic și/sau microarray CGH
• interpretarea trebuie realizată în context clinic endocrinologic și genetic
• rezultatele pot necesita confirmare prin teste suplimentare în cazuri complexe

Tip probă și condiții de recoltare

Probă necesară:

• sânge periferic EDTA

Volum recomandat:

• 2 x 6 ml sânge periferic

Condiții de recoltare:

• recoltare venoasă standard
• transport conform protocolului de citogenetică
• probă stabilă pentru analiză FISH în condiții controlate
• fără pregătire specială a pacientului

Analize asociate recomandate

• Cariotip - Cultura și analiza cromozomilor – evaluare completă cromozomială
• Array CGH – detecție dezechilibre submicroscopice
• AMH (hormon anti-Müllerian) – evaluare endocrinologică
• Testosteron, LH, FSH – profil hormonal
• Analiza genei SRY prin secvențiere – în cazuri selectate
• Consiliere genetică

Particularitate clinică importantă

Analiza FISH pentru cromozomii sexuali și gena SRY reprezintă un instrument esențial în evaluarea tulburărilor de diferențiere sexuală, deoarece permite corelarea directă între structura cromozomială și determinarea sexului genetic. În cazurile complexe, rezultatul trebuie integrat cu datele hormonale, imagistice și genetice pentru stabilirea unui diagnostic complet și a unei conduite terapeutice adecvate.