Panel imunohistochimie - IHC MMR/MSI colon/gastric (MLH1, MSH2, MSH6, PMS2) +/- p53

Acest panel imunohistochimic evaluează integritatea sistemului de reparare a nepotrivirilor ADN (MMR - mismatch repair), mecanism esențial pentru menținerea stabilității genomice.

Sistemul MMR este format din proteinele:

• MLH1
• MSH2
• MSH6
• PMS2

Pierderea expresiei uneia sau mai multor proteine MMR sugerează instabilitate microsatelitară (MSI – microsatellite instability), un subtip molecular important de cancer colorectal.

În anumite cazuri, se poate adăuga și markerul p53, util pentru evaluarea alterărilor suplimentare ale controlului ciclului celular și pentru o caracterizare biologică mai complexă a tumorii.

Acest panel este esențial în oncologia modernă, deoarece identifică pacienții cu suspiciune de sindrom Lynch, precum și pacienții care pot răspunde diferit la imunoterapie.

Afecțiuni sau simptome asociate

Testul este utilizat în:

• Cancer colorectal (colon și rect)
• Polipi colonici cu displazie
• Suspiciune de sindrom Lynch (cancer ereditar colorectal non-polipozic)
• Tumori endometriale asociate sindromului Lynch
• Alte tumori solide asociate defectelor MMR
• Evaluarea instabilității microsatelitare (MSI-H)

Cui se adresează

Testarea se adresează:

• Pacienților diagnosticați cu cancer colorectal
• Pacienților tineri cu cancer colorectal (sub 50 ani)
• Pacienților cu istoric familial de cancer colorectal sau endometrial
• Cazurilor suspecte de sindrom Lynch
• Medicilor oncologi și gastroenterologi pentru decizii terapeutice
• Medicilor anatomopatologi pentru clasificare moleculară

Metodologie de testare

1. Se selectează blocul de parafină (FFPE) reprezentativ tumoral
2. Se realizează secțiuni histologice fine
3. Se aplică anticorpi pentru MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 ± p53
4. Se evidențiază expresia nucleară a proteinelor MMR
5. Se analizează pierderea sau conservarea expresiei proteinelor
6. Se corelează rezultatele între ele și cu morfologia tumorii
7. Se emite raportul imunohistochimic final

Beneficii și importanța clinică

• Identifică instabilitatea microsatelitară (MSI)
• Ajută la selectarea pacienților care necesită investigații suplimentare pentru sindromul Lynch
• Oferă informații prognostice importante în cancerul colorectal
• Ghidează decizia terapeutică (inclusiv imunoterapie)
• Permite stratificarea riscului oncologic
• Contribuie la medicina personalizată
• Poate influența recomandările de screening familial

Particularități și limitări

Particularități

• Reprezintă metoda standard de screening pentru deficitul MMR
• Are valoare prognostică și predictivă importantă
• Este recomandat în ghidurile internaționale pentru cancer colorectal
• Poate fi completat de teste moleculare MSI

Limitări

• Nu toate cazurile MSI sunt detectate exclusiv prin IHC
• Rezultatele pot necesita confirmare moleculară (PCR/NGS)
• Expresia poate fi heterogenă în unele tumori
• Depinde de calitatea materialului tisular

Indicații de testare

• Cancer colorectal nou diagnosticat
• Suspiciune de sindrom Lynch
• Cancer colorectal la pacient tânăr
• Istoric familial sugestiv de cancer ereditar
• Tumori cu morfologie sugestivă MSI
• Decizie terapeutică pentru imunoterapie
• Evaluare prognostică în cancerul colorectal

Interpretarea rezultatelor

Sistem MMR normal (proficient / pMMR)

• Expresie nucleară păstrată pentru toate proteinele (MLH1, MSH2, MSH6, PMS2)
• Sugerează stabilitate microsatelitară (MSS)

Deficit MMR (dMMR)

• Pierdere de expresie pentru una sau mai multe proteine
• Sugerează instabilitate microsatelitară (MSI-H)
• Necesită corelare pentru identificarea cauzei (sporadică vs ereditară)

p53 (opțional)

• Pattern de expresie normal sau mutant (overexpresie sau pierdere completă)
• Oferă informații suplimentare despre agresivitatea tumorală

Interpretarea finală este realizată de medicul anatomopatolog în corelație cu datele clinice și eventual testarea genetică.

Raportarea conform ghidurilor

• Ghidurile ASCO și NCCN pentru cancer colorectal
• Recomandările OMS pentru tumori digestive
• Standardele internaționale pentru testarea MMR/MSI
• Protocoale de diagnostic pentru sindrom Lynch

Factori care pot influența rezultatul

• Fixarea necorespunzătoare a țesutului
• Necroza tumorală
• Heterogenitatea expresiei proteice
• Calitatea blocului FFPE
• Artefacte de procesare histologică
• Timpul de la recoltare la fixare

Condiții pentru recoltare

• Recoltare prin biopsie sau piesă operatorie
• Fixare imediată în formalină tamponată 10%
• Evitarea întârzierii fixării

Specimen de recoltare

• Țesut tumoral colorectal inclus în parafină (FFPE)
• Biopsii endoscopice sau piese chirurgicale

Probă

• Blocuri de parafină (FFPE) reprezentative tumoral
• Lame histologice dacă sunt solicitate

Stabilitate

• Blocurile FFPE sunt stabile pe termen lung
• Expresia antigenică poate scădea în timp în condiții neoptime
• Calitatea fixării influențează semnificativ rezultatul

Analize asociate recomandate

• Testare MSI prin PCR sau NGS
• Panel genetic pentru sindrom Lynch (MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 germinal)
• Examen histopatologic standard
• KRAS / NRAS / BRAF mutații
• Testare PD-L1 (în cazuri selectate)
• Profil molecular tumoral extins (NGS)