Analiza genei DMD prin tehnica MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) este un test genetic utilizat pentru identificarea delețiilor și duplicațiilor la nivelul genei DMD, responsabile de distrofia musculară Duchenne (DMD) și distrofia musculară Becker (BMD).
*Termenul de execuție reprezintă numărul maxim de zile lucrătoare în care va fi eliberat rezultatul. Acest termen are rol informativ și va fi confirmat în punctul de recoltare.
Testul permite evaluarea variațiilor de număr de copii (CNV) la nivelul exonilor genei DMD, fiind esențial în diagnosticul molecular al celor mai frecvente forme de distrofie musculară X-linkată.
Termen de execuție*
45 zile lucrătoare
Despre analiza genei DMD – testare MLPA
Gena DMD, localizată pe cromozomul Xp21.2, este una dintre cele mai mari gene umane și codifică proteina distrofină, esențială pentru stabilitatea membranei celulelor musculare.
Defectele genei determină:
Distrofia musculară Duchenne (DMD) – formă severă, cu debut precoce și evoluție rapidă
Distrofia musculară Becker (BMD) – formă mai ușoară, cu debut mai tardiv și progresie lentă
Metoda MLPA este standardul de aur pentru detectarea:
delețiilor exonice (un exon sau mai mulți exoni)
duplicațiilor exonice sau multi-exonice
rearanjamentelor mari ale genei DMD
Aceste tipuri de modificări reprezintă aproximativ 60–70% din cazurile de DMD/BMD.
Afecțiuni sau simptome asociate
Testul este indicat în:
distrofie musculară Duchenne
distrofie musculară Becker
creșterea persistentă a creatinkinazei (CK)
slăbiciune musculară progresivă la copil
întârziere în achiziția mersului
căderi frecvente și dificultăți motorii
mers „waddling” (legănat)
hipertrofie pseudomusculară a gambelor
cardiomiopatie dilatativă de cauză genetică
suspiciune de purtătoare la femei
istoric familial de distrofie musculară X-linkată
Cui se adresează
băieților cu suspiciune de distrofie musculară Duchenne/Becker
copiilor cu întârziere motorie și CK crescută
pacienților cu miopatie progresivă de cauză necunoscută
femeilor suspectate că sunt purtătoare de mutații DMD
familiilor cu istoric de distrofie musculară X-linkată
cazurilor cu NGS negativ sau incomplet pentru DMD
pacienților evaluați în neurologie pediatrică
cazurilor cu cardiomiopatie dilatativă idiopatică
Metodologie de testare
extracție ADN genomic din sânge periferic EDTA
amplificare multiplex a exonilor genei DMD
ligare specifică a sondelor MLPA
cuantificare fragmentară a produselor amplificate
analiză comparativă pentru determinarea variațiilor de număr de copii
identificarea:
delețiilor exonice
duplicațiilor exonice
rearanjamentelor mari ale genei DMD
interpretare conform ghidurilor internaționale de genetică medicală
Beneficii și importanță clinică
detectează cea mai frecventă categorie de mutații din DMD (deleții/duplicații)
confirmă diagnosticul molecular al distrofiilor musculare Duchenne și Becker
permite identificarea purtătoarelor la femei
oferă informații esențiale pentru consiliere genetică familială
contribuie la stabilirea prognosticului
permite corelarea cu eligibilitatea pentru terapii exon-skipping
completează analiza prin secvențiere NGS a genei DMD
Particularități și limitări
nu detectează mutații punctiforme (SNV) sau mici INDEL
trebuie completată frecvent cu secvențiere NGS a genei DMD
unele rearanjamente complexe pot necesita metode suplimentare
interpretarea necesită corelare cu fenotipul clinic și nivelul CK
nu înlocuiește evaluarea clinică neurologică și cardiologică
poate necesita testare familială suplimentară pentru confirmare
Tip probă și condiții de recoltare
Probă necesară:
sânge integral EDTA
Volum recomandat:
2 × 6 ml sânge periferic
Condiții de recoltare:
recoltare venoasă standard
nu necesită pregătire specială
transport conform protocolului laboratorului
ADN stabil pentru analiză MLPA
Analize asociate recomandate
Secvențiere NGS a genei DMD – mutații punctiforme
Creatinkinază (CK) – marker muscular
Panel NGS boli neuromusculare
EMG (electromiografie)
RMN muscular
Evaluare cardiologică (ECG, ecocardiografie)
Testare genetică familială pentru purtători
Particularitate clinică importantă
Testarea MLPA a genei DMD este esențială în diagnosticul distrofiilor musculare Duchenne și Becker, deoarece majoritatea cazurilor sunt cauzate de deleții sau duplicații exonice. Identificarea exactă a rearanjamentului genetic este crucială pentru confirmarea diagnosticului, consilierea familială și, în unele cazuri, pentru eligibilitatea pentru terapii personalizate de tip exon skipping.