Analiza genei DMD prin secvențiere NGS este un test genetic avansat utilizat pentru identificarea variantelor patogene asociate cu distrofia musculară Duchenne (DMD) și distrofia musculară Becker (BMD). Testul permite analiza completă a regiunilor codante ale genei DMD și identificarea mutațiilor punctiforme, inserțiilor și delețiilor mici responsabile de aceste afecțiuni neuromusculare ereditare.
*Termenul de execuție reprezintă numărul maxim de zile lucrătoare în care va fi eliberat rezultatul. Acest termen are rol informativ și va fi confirmat în punctul de recoltare.
Distrofiile musculare Duchenne și Becker sunt boli genetice cu transmitere X-linkată, cauzate de modificări ale genei DMD, una dintre cele mai mari gene din genomul uman, care conține 79 exoni și codifică proteina distrofina, esențială pentru integritatea fibrei musculare.
Termen de execuție*
40 zile lucrătoare
Despre analiza genei DMD – Duchenne/Becker
Gena DMD, localizată pe cromozomul Xp21.2, codifică distrofina, o proteină structurală care conectează citoscheletul muscular de matricea extracelulară și protejează fibra musculară în timpul contracției. În absența distrofinei sau în prezența unei proteine anormale, fibrele musculare suferă leziuni progresive și sunt înlocuite treptat cu țesut fibros și adipos.
Forma Duchenne este cea mai severă și apare de obicei în copilăria timpurie, cu pierderea mersului în jurul vârstei de 10–12 ani. Forma Becker este mai ușoară, cu debut mai tardiv și evoluție mai lentă. Diferența dintre cele două forme depinde în mare măsură de tipul mutației și de impactul acesteia asupra sintezei distrofinei.
Secvențierea NGS permite identificarea:
variantelor punctiforme (SNV)
inserțiilor și delețiilor mici (INDEL)
variantelor splice-site
variantelor patogene și probabil patogene din regiunile analizate ale genei DMD
Afecțiuni sau simptome asociate
Testul este indicat în evaluarea:
distrofiei musculare Duchenne (DMD)
distrofiei musculare Becker (BMD)
întârzierii dezvoltării motorii
slăbiciunii musculare progresive
mersului legănat („waddling gait”)
căderilor frecvente
dificultăților la urcat scări
hipertrofiei pseudomusculare a gambelor
valorilor crescute ale creatinkinazei (CK)
cardiomiopatiei dilatative de cauză genetică
suspiciunii de purtător la femei
Cui se adresează
băieților cu suspiciune clinică de distrofie musculară Duchenne sau Becker
pacienților cu hiperCKemie persistentă de cauză necunoscută
persoanelor cu cardiomiopatie asociată suspiciunii de distrofie musculară
femeilor cu risc de a fi purtătoare ale unei variante DMD
familiilor cu istoric de DMD/BMD
pacienților cu rezultate neconcludente la alte investigații genetice
Metodologie de testare
extracție ADN genomic din sânge periferic EDTA
secvențiere de nouă generație (NGS) a genei DMD
analiză bioinformatică avansată
identificarea:
variantelor SNV
inserțiilor/delețiilor mici (INDEL)
variantelor de splicing
clasificarea variantelor conform recomandărilor ACMG
interpretare clinică în contextul fenotipului pacientului și al bazei de date Centogene pentru boli rare
Beneficii și importanță clinică
confirmă diagnosticul molecular al distrofiei Duchenne sau Becker
permite identificarea purtătoarelor în familie
contribuie la evaluarea prognosticului și a evoluției bolii
facilitează accesul la terapii țintite și studii clinice
permite consilierea genetică și planificarea familială
ajută la diferențierea de alte miopatii genetice
oferă informații relevante pentru monitorizarea cardiologică și neurologică
Particularități și limitări
gena DMD este una dintre cele mai mari gene umane, cu peste 2,5 Mb și 79 de exoni, ceea ce face necesară o analiză genetică complexă
aproximativ 60–70% dintre cazurile de DMD sunt cauzate de deleții mari și 5–15% de duplicații mari, modificări care pot necesita tehnici complementare precum MLPA pentru caracterizare completă
pot fi identificate variante cu semnificație incertă (VUS)
un rezultat negativ nu exclude complet existența unor rearanjamente complexe nedetectabile prin metodologia utilizată
interpretarea trebuie realizată în context clinic și familial
Tip probă și condiții de recoltare
Probă necesară:
sânge integral EDTA
Volum recomandat:
2 × 6 ml sânge periferic
Condiții de recoltare:
recoltare prin puncție venoasă în vacutainer EDTA
nu necesită pregătire specială
transport conform instrucțiunilor laboratorului
recomandată completarea informațiilor clinice și a istoricului familial
Analize asociate recomandate
DMD – analiza delețiilor și duplicațiilor prin MLPA
Panel NGS boli neuromusculare ereditare
Creatinkinază (CK) – marker biochimic muscular
EMG (electromiografie)
RMN muscular
Evaluare cardiologică (ECG și ecocardiografie)
Testare genetică familială pentru purtători
Particularitate clinică importantă
Diagnosticul molecular al genei DMD are o importanță terapeutică majoră, deoarece anumite variante genetice pot face pacientul eligibil pentru terapii specifice de tip exon skipping sau alte tratamente țintite aprobate pentru anumite mutații. Din acest motiv, caracterizarea genetică precisă a mutației este esențială atât pentru confirmarea diagnosticului, cât și pentru stabilirea opțiunilor terapeutice disponibile.